酶標(biāo)檢測儀單波長與多波長應(yīng)用解析原理

作者：admin 時(shí)間：2021-06-15 01:18:09 點(diǎn)擊次數(shù):1458

　         酶標(biāo)檢測儀的波長應(yīng)用解析原理。當(dāng)酶標(biāo)檢測儀采用單波長測量吸光度時(shí)，除了測量過程中的內(nèi)源干擾(包括噪聲、漂移、電壓等)外，液體的表面張力也會(huì)對(duì)其產(chǎn)生較大的影響。在檢測過程中，由于液體表面的表面張力，液體表面不是平坦的表面，而是凹面，從側(cè)面看像凹透鏡，必然會(huì)影響光路的正常通過。由于液體表面的凹面的影響，當(dāng)光線通過液體表面時(shí)，除了一部分通常被液體吸收外，還有一部分被折射和反射(如光線通過凹透鏡)，這就影響了吸光度的檢測。微孔板閱讀器使用點(diǎn)光源，通過光纖。如果每次都能在同一位置檢測到，就保證了吸光度的重復(fù)性。然而，由于機(jī)械運(yùn)動(dòng)引起的誤差，不可能保證每個(gè)孔都在相同的位置。部分被檢測到，所以孔與孔之間有一定的區(qū)別。
      酶標(biāo)檢測儀的波長應(yīng)用解析，在雙波長測量中，減少了測量干擾和電路干擾，使測量結(jié)果顯著提高。由于液體表面張力的差異，單波長測量的誤差比較大。另外，使用不同的洗滌劑會(huì)影響*后一次添加后的底物和終止液的水平。用添加了表面活性劑的洗滌劑清洗后，產(chǎn)生的液位會(huì)更凹，這對(duì)單波長檢測有更大的影響。它與表面活性劑的濃度成正比。用中性蒸餾水洗滌后，單波長和雙波長檢測技術(shù)的結(jié)果基本相同。
      酶標(biāo)檢測儀在酶聯(lián)免疫法測定抗原、抗體中，常用標(biāo)記酶辣根過氧化物酶所使用的底物一般是鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺，顯色終止后，二者在6 3 0nm 和6 5 5nm處的吸光度值都只在吸收峰處 (4 9 2 n m/4 5 0 nm )吸光度值的 1 %以下，因此，利用雙波長檢測，不會(huì)影響檢測的靈敏度。建議在進(jìn)行酶聯(lián)免疫檢測時(shí)，酶標(biāo)儀比色應(yīng)該首先雙波長。這樣可以提高臨界值處標(biāo)本的分析準(zhǔn)度，減少實(shí)驗(yàn)誤差。

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